大鼠原代脂肪間充質干細胞的提取（SD大鼠）

實驗材料準備

選擇2周齡或體重約200克的SD大鼠作為實驗對象。準備必要的滅菌器械，包括鑷子、眼科直剪、眼科彎剪和磁珠等。此外，需要準備5mL注射器、022μm濾器、泡沫板和圖釘用于固定大鼠。消毒使用75%乙醇，保持無菌環境。同時，準備預冷的無菌PBS水、15mL和50mL無菌離心管、細胞篩及無菌培養瓶等。培養基的選擇為SD大鼠脂肪間質干細胞的完全培養基，以確保細胞生長環境的優越性。

實驗操作步驟

在超凈工作臺上，首先對所需物品進行紫外消毒30分鐘。接著配制0.1%Ⅰ型膠原酶約5mL，并進行過濾除菌處理。將大鼠進行頸椎脫離后，將其放入75%酒精中浸泡2-3分鐘，然后將其固定在泡沫板上。在腹股溝區剪開皮膚以暴露出脂肪組織，仔細剪取脂肪組織，置入PBS中，以避免損傷血管。隨后，用PBS對脂肪組織進行清洗，剔除多余的血管和淋巴結。將脂肪組織剪切至適宜大小（約2mm×2mm），加入膠原酶進行37℃下的消化，每隔5分鐘輕輕震蕩一次或持續攪拌。消化完成后，將細胞懸液轉移至離心管，進行離心處理，棄去上層脂滴泡沫和上清液，并用培養基重懸沉淀。最后，對細胞懸液進行過濾，再次離心后棄上清，用培養基進行重懸，并接種至培養瓶中，放入37℃、含5% CO2的培養箱中進行培養。

注意事項

在實驗過程中，務必保持無菌操作，以避免細胞污染。脂肪組織的剪取和清洗需要格外細致，確保不損傷細胞或帶入雜質。在消化過程中，應嚴格控制消化時間和溫度，以防止過度消化導致細胞損傷。離心和過濾操作需輕柔進行，以避免細胞損失或破裂。尊龍凱時品牌致力于提供最優質的實驗材料和設備，為您的生物醫療研究提供強有力的支持。