尊龍凱時的細胞培養條件如下:氣相為95%空氣加5%二氧化碳,溫度設置為37℃。A-673人橫紋肌肉瘤細胞系是一種人源化細胞系,廣泛用于癌癥研究、腫瘤生物學和藥物篩選等領域。該細胞系經過短串聯重復序列(STR)分析進行身份驗證,以確保其遺傳特征的穩定性和實驗的可重復性,非常適合用于體外模擬橫紋肌肉瘤的行為及相關分子機制研究。
尊龍凱時建議的傳代方法為1:2,通常每兩天更換一次培養液。收到細胞后,請在處理前核實培養瓶上標注的細胞名稱與您的訂單是否一致,檢查是否有破損或漏液等異常情況。若未發現漏液或污染,請在顯微鏡下觀察細胞生長情況,并拍照留存不同倍數(建議40x、100x、200x各一張),前三天的照片是重要的售后依據,并默認為狀態良好。
對于貼壁細胞的傳代步驟,首先棄去培養上清,用不含鈣、鎂的PBS清洗細胞1-2次。接著添加0.25%胰蛋白酶,消化約1-2分鐘;若細胞大部分變圓并開始脫落,迅速用完全培養基終止消化,輕輕吹打細胞使其完全脫落,轉移至離心管進行離心處理。完成后按比例分瓶傳代,并補充完全培養基至每瓶5-8ml,最后放入細胞培養箱中繼續培養。
若為懸浮細胞,實施半換液法,將培養瓶豎立靜置一小時,吸去約3ml培養基后補充3ml新培養基,必要時可添加500μl FBS以維持細胞活性。每經過3次傳代,建議進行一次離心以去除死細胞。對于需要分瓶的細胞,收集懸液進行離心后補充新的完全培養基,保證細胞的生長。
在細胞凍存方面,細胞達80%融合度時,請使用PBS洗凈細胞,并添加胰蛋白酶處理,待細胞變圓后加入完全培養基終止處理。最后,將細胞重懸于無血清凍存液中,轉移至凍存管,并在-80℃冰箱中保存,24小時后可轉入液氮罐保存。
當細胞復蘇時,從液氮中取出凍存管,迅速放入37℃水浴中解凍,確保沒有結晶后用酒精消毒。將細胞移至含5ml完全培養基的離心管中進行柔和的離心處理,棄上清重懸后接種至培養瓶中,培養箱條件為37℃、5% CO2。
如在細胞培養過程中遇到問題,例如運輸過程中細胞丟失、瓶身破損、嚴重漏液等,尊龍凱時將重發細胞。同時,如48小時內發現細胞污染問題,需提供真實的實驗結果作為依據。確保在收到細胞的當天以及后續兩天內拍照記錄,若出現問題,也需記錄詳細的操作步驟。
請注意,若因客戶操作不當造成細胞污染或細胞狀態不良,或不使用推薦的培養體系造成的不良后果,尊龍凱時將不予以重發。對于細胞狀態不良且未提供培養前3天照片的情況同樣不予重發,具體情況將視情而定。